甲基化分析服务-亚硫酸氢盐测序法(BSP)
【技术简介】
(1)技术原理
用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变。针对要调查的区域设计BSP引物进行PCR扩增,对扩增产物进行测序就可以判断哪些CpG位点发生了甲基化;一般将PCR产物克隆后进行测序成功率会比较高。
(2)技术应用
肿瘤的早期预测、分类分级、预后评估及多种疾病的分析;转录水平分析:位于启动子区域的甲基化一般会抑制转录;细胞凋亡等调控机制的研究。
【服务内容】
根据待测基因序列设计相应引物;基因组DNA的提取和质量检测;亚硫酸氢钠修饰基因组DNA;修饰后DNA纯化回收;根据实验的要求进行BSP或者qMSP实验;实验结果的分析以及向客户提供实验报告。
【客户须知及标本要求】
(1)客户提供:要调查的基因名称、种属,要调查的甲基化区域或位点;
(2)样品要求:细胞≥105个;组织≥100mg;全血≥0.5ml;基因组DNA ≥5μg;所有样品建议干冰寄送,保持低温,保证样品质量。