蛋白质质谱鉴定
(1)技术原理
单一蛋白的质谱鉴定:用蛋白酶将蛋白质消化成肽段混合物,经MAILDI或ESI等软电离手段将其离子化,然后通过质量分析器将具有特定质核比的肽段离子分离开来。通过实际谱图和理论上蛋白质经过蛋白酶消化后产生的一级质谱峰图和二级质谱峰图进行的比对,进行蛋白鉴定。
混合蛋白样品的质谱鉴定:混合蛋白样品的质谱鉴定的方法被称为“鸟枪法”或者多维蛋白质鉴定技术(Mud PIT)。现将蛋白溶液或SDS-PAGE条带酶切成肽段混合物,再用高效液相色谱将其分离成简单组分,最后依次导入高分辨率质谱仪中进行质量分析。
(2)技术应用
蛋白质表达谱和混合蛋白质的鉴定;相互作用蛋白质的鉴定;稀有物种的蛋白质组鉴定。
【服务内容】
蛋白质样本制备(客户可提供一制备好的样本,如蛋白溶液或SDS-PAGE条带),包括蛋白质的分离、纯化、酶切;蛋白质酶切、液相分离、质谱鉴定和数据库检索。
【客户须知及标本要求】
(1)客户须明确检测目的和具体要求,最好能提供1~2篇文献或资料。
(2)样品来源:考染蛋白质全部接受;银染的蛋白质不得使用戊二醛作为固定剂;蛋白质干粉;蛋白质溶液等。
(3)寄送要求:蛋白质条带可用冰袋包装寄送,蛋白质溶液用干冰或液氮寄送。