细胞转染
(1)技术原理
将外源性基因(载体)转入细胞内,已成为研究基因与细胞功能的重要手段,目前常用的包括小RNA干预(RNAi)和外源性表达载体转入两种手段,二者分别发挥基因沉默和基因表达的功能,在实现基因敲除、鉴定基因的生物学特性、研究基因表达与沉默对于细胞生长及相关因子的影响、研究基因表达的调控机制等方面发挥重要作用。
转染的方法较多,有脂质体转染、电穿孔转染以及病毒感染等,依据转染持续时间又分为两种,一种是瞬时转染,外源性DNA不整合到细胞染色体,转染可以维持24-96小时,用于研究转染后细胞的功能变化、基因或蛋白的变化等;一种是稳定转染,外源性DNA整合到细胞染色体,可以持续表达外源性基因,用于稳定细胞株的构建。
(2)技术应用
随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具,在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。
【服务内容】
载体构建(或客户自备载体);细胞培养与瞬时转染;WB和qPCR检测。
【客户须知及标本要求】
1、客户须明确检测目的和具体要求,最好能提供1~2篇文献或资料。
2、客户提供生长状况良好的细胞株,同时提供细胞特性,培养条件及相关注意事项;公司也可以为客户代购细胞并且提供保种服务;
3、客户提供质粒,详细说明该质粒的大小、浓度、抗性、拷贝数等相关背景资料。